梯度PCR擴(kuò)增儀的日常維護(hù)保養(yǎng)工作

更新時(shí)間：2022-10-27

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　　梯度PCR擴(kuò)增儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴(kuò)增儀。適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Picymerase Chain Reaction,PCR）為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。

　　PCR反應(yīng)能否成功，退火溫度是關(guān)鍵，梯度PCR儀每個(gè)孔的溫度可以在范圍內(nèi)按照梯度設(shè)置，根據(jù)結(jié)果，一步就可以摸索出最適反應(yīng)條件。一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這樣可節(jié)省試驗(yàn)時(shí)間、提高實(shí)驗(yàn)效率，又節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。

　　梯度PCR擴(kuò)增儀的日常維護(hù)保養(yǎng)工作：

　　1、樣品池的清洗

　　先打開蓋子，然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min，然后清洗被污染的孔；用微量移液器吸取液體，用棉簽吸干剩余液體，設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行，讓殘余液體揮發(fā)去除，一般5～10min即可。

　　2、熱蓋的清洗

　　對于熒光定量基因擴(kuò)增儀，當(dāng)有熒光污染出現(xiàn)，而且這一污染并非來自樣品池時(shí)，或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí)，需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面，確保樣品池的孔干凈，無污物阻擋光路。

　　3、儀器外表面的清洗

　　清洗梯度PCR擴(kuò)增儀的外表面可以除去灰塵和油脂，但達(dá)不到消毒的效果，選擇沒有腐蝕性的清洗劑對基因擴(kuò)增儀的外表面進(jìn)行清洗。

　　4、更換保險(xiǎn)絲

　　先將基因擴(kuò)增儀關(guān)機(jī)，拔去插頭，打開電源插口旁邊的保險(xiǎn)盒，換上備用的保險(xiǎn)絲，觀察是否恢復(fù)正常。

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